UV-spectrofotometers worden veel gebruikt in organisch chemisch onderzoek. Meestal gebruikt voor stofidentificatie, zuiverheidscontrole en onderzoek naar organische moleculaire structuur. In termen van kwantificering kan het gehalte van elke component in verbindingen en mengsels met complexe structuren worden bepaald. Het kan ook de dissociatieconstante van de stof, de stabiliteitsconstante van het complex, de identificatie van het molecuulgewicht van de stof en het indicatie-eindpunt in de microtitratie en als detector in de hogedrukvloeistofchromatografie meten.
Keuze van UV-spectrofotometer:
Wanneer we verschillende instrumenten kiezen, zijn er bepaalde criteria, zoals meetnauwkeurigheid of meetbereik. Bij het kiezen van een UV-spectrofotometer houden we rekening met optische constructie, spectraalbereik, monstertype en analytische hulpmiddelen.
De optische structuur verwijst voornamelijk naar de vraag of het licht van de UV-spectrofotometer een enkele of een dubbele straal is. Een enkele straal wordt gemeten door een enkele lichtstraal, de golflengte wordt tijdens het meetproces gegeven en vervolgens worden de absorptieresultaten verkregen via het gemeten object en het controleobject. De dubbele balk wordt in tweeën gedeeld door een chopperwiel.
Lichtbronnen zijn onder meer infrarood, ultraviolet en zichtbaar licht. Wolfraam- en halogeenlampen bedekken over het algemeen alleen het zichtbare lichtgedeelte. De xenonlamp kan de ultraviolette en zichtbare lichtgebieden bedekken.
UV/vis-spectrofotometers gebruiken meestal fotomultiplicatorbuizen en fotodiodes om de absorptie te meten.
De UV-spectrofotometer accepteert monsterputjes, cuvetten, pipetten en microplaten voor de meeste soorten monsters.
De meeste stand-alone UV-spectrofotometers bevatten software die het instrument aanstuurt en gegevens beheert. Voor hoogwaardige instrumenten, die meestal in combinatie met een pc worden gebruikt, is aanvullende software van de fabrikant vereist. Tegelijkertijd kunnen gebruikers er ook voor kiezen om de software te upgraden om aan hun behoeften te voldoen.
Het basiswerkingsprincipe van UV-spectrofotometer:
De UV-spectrofotometer gebruikt een bepaalde frequentie van UV-zichtbaar licht om de geanalyseerde organische stof te bestralen, waardoor de overgang van valentie-elektronen in het molecuul wordt veroorzaakt, die selectief worden geabsorbeerd. Een reeks spectra waarvan de absorptie varieert met de golflengte, die de kenmerken van het monster weerspiegelt. In het bereik van ultraviolet en zichtbaar licht, voor een specifieke golflengte, is de mate van absorptie evenredig met de concentratie van de component in het monster, zodat het gemeten spectrum kwalitatief kan worden geanalyseerd en gebaseerd op de vergelijking van de absorptie met een standaard monster van bekende concentratie, het kan ook kwantitatieve analyse zijn.