Eerste, de centrifugatietijd:
Centrifugatietijd is een zeer belangrijke factor die het centrifugale effect beïnvloedt. De benodigde centrifugatietijd voor verschillende centrifugatiemethoden zal verschillend zijn. Het volgende is een gedetailleerde introductie van differentiële centrifugatie en centrifugatie met gelijke dichtheidsgradiënt en centrifugatie met dichtheidsgradiënt. Voor differentiële centrifugatie verwijst de centrifugatietijd naar de tijd dat een bepaald deeltje volledig bezinkt op de bodem van de centrifugebuis; voor iso-dichtheidsgradiëntcentrifugatie verwijst de centrifugatietijd naar de evenwichtstijd waarop het deeltje het iso-dichtheidspunt volledig bereikt; De centrifugatietijd van een dichtheidsgradiëntcentrifugatie verwijst naar de tijd voor het vormen van een goed gedefinieerde zone. Voor de laatste twee centrifugatiemethoden is de vereiste zonevormingstijd of evenwichtstijd gecompliceerd en kan deze na de test worden bepaald.
Ten tweede, de centrifugaalsnelheid:
De rotatiesnelheid van de centrifuge wordt voornamelijk bepaald door de rotatiesnelheid van de rotor en de rotatiestraal van de deeltjes. Bij het beschrijven van de middelpuntvliedende omstandigheden wordt dit vaak uitgedrukt door het relatieve middelpuntvliedende krachtveld. In het echte werk verwijzen de gegevens van het middelpuntvliedende krachtveld naar de gemiddelde waarde, dat wil zeggen, verwijst naar het middelpuntvliedende krachtveld van de deeltjes op het punt in de centrifugatieoplossing.
Ten derde, de pH en temperatuur van het centrifugemedium;
De pH-waarde van het centrifugatiemedium wordt in het algemeen ingesteld in het pH-bereik waarin het enzym stabiel is. Er kan een bufferoplossing worden gebruikt. In de test wordt het wegen uitgevoerd en wordt de omgeving van de centrifuge zelf gecorrodeerd door de omgeving van perzuur of overbase te vermijden.
Bij het werken met een centrifuge moeten we naast speciale aandacht voor de keuze van het centrifugaalmedium ook de temperatuur en de pH van de mediumoplossing controleren om agglutinatie, denaturatie en deactivering van de afgescheiden stoffen te voorkomen. We zullen de centrifugetemperatuur regelen tot ongeveer 4 ° C. Voor sommige enzymen met een goede thermische stabiliteit kan centrifugeren ook bij kamertemperatuur worden uitgevoerd.